MODULE DE FORMATION DU CCPA SUR : LES ANIMAUX DE LABORATOIRE UTILISÉS

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MODULE DE FORMATION DU CCPA SUR : LES ANIMAUX DE LABORATOIRE UTILISÉS EN RECHERCHE BIOMÉDICALE www.ccac.ca

Pertinence de ce module de formation Ce module de formation est pertinent pour tous les utilisateurs d’animaux qui travaillent avec des animaux hébergés dans un vivarium (en milieu fermé, notamment en laboratoires) en recherche biomédicale Ce module de formation porte sur les animaux suivants qui vivent dans un vivarium : rongeurs lapins oiseaux amphibiens Photo : gracieuseté de Dre S. Craig reptiles primates non humains autre mammifères 2

Objectifs de ce module de formation Comprendre les différents types de modèles animaux utilisés en recherche biomédicale et l’importance de leur sélection Reconnaître l'importance de la prise en compte et de la maîtrise de toutes les variables prévues dans la méthodologie Élaborer une liste de vérification des variables qui ont une influence sur le programme de recherche Décrire et accepter les responsabilités liées au bon déroulement d’une expérience 3

Plan de ce module de formation Emploi et sélection de modèles animaux en recherche biomédicale Identification des variables qui influencent la réponse d'un modèle animal à une expérience donnée : facteurs liés aux animaux facteurs physiques et environnementaux facteurs liés à l’entretien, aux manipulations et aux soins courants facteurs liés aux manipulations aux fins de la recherche Responsabilités de chaque membre de l’équipe participant à un projet de recherche : chercheur principal étudiants des cycles supérieurs, étudiants au postdoctorat, techniciens en recherche directeur de l’animalerie personnel de soin aux animaux personnel vétérinaire pour animaux d’expérimentation 4

Modèles animaux employés en recherche biomédicale Les modèles animaux employés en recherche biomédicale permettent l’étude de : la biologie animale le comportement de l’animal les processus pathologiques spontanés ou induits les phénomènes équivalents chez l’humain 5

Types de modèles animaux employés en recherche biomédicale 1. Modèles spontanés ou « naturels » modèles animaux chez lesquels des maladies ou des affections d’origine naturelle sont identiques à celles que l’on retrouve chez l’humain (p. ex, le diabète et l’arthrite) 2. Modèles expérimentaux modèles animaux chez lesquels le chercheur reproduit expérimentalement une affection ou une maladie (p. ex, le cancer ou un accident vasculaire cérébral) 6

Types de modèles animaux employés en recherche biomédicale 3. Modèles génétiquement modifiés modèles animaux dont le code génétique a été manipulé pour provoquer la maladie ou l’affection 4. Modèles négatifs modèles animaux qui sont résistants à une affection ou à une maladie donnée 5. Modèles orphelins modèles animaux présentant des affections pour lesquelles il n’existe pas d’équivalent chez l’humain 7

Choix d’un modèle animal REMPLACEMENT Solutions autres que l’emploi d’animaux ou utilisation d’animaux ayant une sensibilité moindre RÉDUCTION Utilisation de modèles animaux appropriés en quantités suffisantes afin de réduire les variations et le nombre d’animaux requis RAFFINEMENT Modification des procédés d’entretien ou d’expérimentation pour diminuer la douleur et la détresse et améliorer le bienêtre de l’animal Avant de choisir un modèle animal, le chercheur principal doit envisager des solutions de rechange à l'emploi d'animaux vivants (principe des Trois R) Le chercheur doit envisager tous les facteurs lorsqu’il choisit le modèle animal approprié pour son expérimentation Pour obtenir de plus amples renseignements sur ce sujet, consultez le Module de formation du CCPA sur : les Trois R de l'expérimentation animale éthiquement acceptable (2003) et visitez le microsite du CCPA sur les Trois R au www.ccac.ca/fr/alternatives 8

Facteurs influençant les résultats de la recherche faisant appel à l’utilisation des animaux Facteurs liés à l’entretien, aux manipulations et aux soins courants Stress lié à l’animal Période de la (des) manipulation(s) Facteurs physiques et environnementaux Température de la pièce Stress lié au transport Facteurs liés aux manipulations aux fins de la recherche Humidité relative Litière Facteurs liés aux animaux Âge, sexe, état reproducteur Maladie Nourriture et eau Facteurs génétiques Photo : gracieuseté de Dre S. Craig Facteur expérimental de stress Flore microbienne Rythmes biologiques Stress lié à l’hébergement Ventilation Bruit Douleur Éclairage 9

Facteurs non expérimentaux influençant les résultats de la recherche faisant appel à l’utilisation des animaux Les facteurs non expérimentaux pouvant influencer la réponse du modèle animal (et brouiller les résultats de l’étude) peuvent être regroupés comme suit : facteurs liés aux animaux facteurs physiques et environnementaux facteurs liés à l’entretien, aux manipulations et aux soins courants facteurs liés aux manipulations aux fins de la recherche Photo : gracieuseté de Dre S. Craig 10

Facteurs liés aux animaux 11

Facteurs liés aux animaux 1. Âge, sexe et état reproducteur les réactions peuvent varier selon l’âge et le sexe de l’animal les variations hormonales et physiologiques peuvent également influencer les résultats des femelles et des mâles 2. Constitution génétique opposition des lignées endogames (génétiquement identiques) à des lignées exogames la manipulation génétique peut modifier le phénotype de l’animal 12

Facteurs liés aux animaux 3. Flore microbienne la plupart des animaux utilisés en recherche portent en eux une population microbienne qui peut représenter une source de variabilité 4. Rythmes biologiques (circadiens) le métabolisme varie selon le moment de la journée p. ex., le métabolisme des rongeurs augmente pendant la nuit les médicaments peuvent avoir un effet variable en fonction du moment de la journée où ils sont administrés il est important d’effectuer les manipulations au même moment de la journée pour tous les animaux 13

Facteurs liés aux animaux 5. Maladies Maladie clinique : Maladie subclinique : maladie apparente chez l’animal l’animal semble être en bonne santé, malgré la présence d’agents infectieux Photo gracieuseté de Dr J. Gourdon Infection aux acariens chez une souris Photo gracieuseté de Dr J. Gourdon Les modèles immunodéficients ou immunocompromis sont très sensibles aux organismes habituellement non pathogènes Comment pouvez-vous vous assurer que ce lapin n’est pas porteur d’un virus, d’une bactérie ni d’un parasite qui brouillera les résultats de votre étude? Pour obtenir de plus amples renseignements sur ce sujet, consultez le Module de formation du CCPA sur : les maladies infectieuses (2010) 14

Facteurs physiques et environnementaux Pour obtenir de plus amples renseignements sur ce sujet, consultez le Chapitre III – L’environnement, Manuel sur le soin et l’utilisation des animaux d’expérimentation Vol. 1 (2e édition) 1993 15

Facteurs physiques et environnementaux 1. Température de la pièce les variations peuvent causer des modifications : au comportement (contacts physiques entre animaux et frissons) à la vitesse du métabolisme de l’animal (consommation d’une plus grande quantité de nourriture pour augmenter la température de leur corps) les variations devraient être : enregistrées limitées à 2 ºC, car elles se répercutent sur les processus métaboliques, y compris la métabolisation des médicaments 16

Facteurs physiques et environnementaux 2. Humidité relative l’humidité relative peut avoir une incidence au niveau : du réglage de sa température de sa consommation alimentaire de sa performance de sa vulnérabilité aux maladies la plupart des animaux d’expérimentation préfèrent une humidité relative entre 40 à 60 % Si l’humidité relative est basse pendant une longue période, il peut apparaître des cas de nécrose annulaire chez les jeunes rat non sevrés, ainsi qu’une irritation des voies respiratoires les niveaux d’humidité doivent être adéquats pour les espèces et doivent demeurés relativement constants ( 5 %) 17

Facteurs physiques et environnementaux 3. Ventilation un taux de renouvellement de l'air élevé est nécessaire pour évacuer la chaleur, l'ammoniac, le gaz carbonique, ainsi que les particules aériennes qui sont produits par les animaux doit être élevé 4. Éclairage cycle jour-nuit il est nécessaire que les rythmes diurnes soient constants intensité de la lumière les rongeurs albinos subissent des lésions de la rétine lorsque l’intensité de l’éclairage dépasse 300 lux longueur d’onde la longueur d’onde influence le poids des organes des souris et la durée de leur cycle œstrien 18

Facteurs physiques et environnementaux 5. Bruit Peut déclencher des convulsions chez les jeunes rongeurs et peut avoir une incidence sur : la prise alimentaire la reproduction la pression artérielle la réponse immunitaire le nombre de globules blancs le taux de cholestérol sanguin la capacité d’apprentissage 19

Facteurs physiques et environnementaux 6. Alimentation et eau un régime alimentaire adapté, reproductible et qui répond aux besoins nutritionnels des animaux être eau confirme aux normes pour la consommation humaine 7. Litière une litière devrait être fournie régulièrement aux animaux 20

Facteurs liés à l'entretien, aux manipulations et aux soins courants Pour obtenir de plus amples renseignements sur le sujet, consultez le Chapitre II – Installations pour les animaux d’expérimentation, Manuel sur le soin et l’utilisation des animaux d’expérimentation Vol. 1 (2e édition) 1993 21

Facteurs liés à l'entretien, aux manipulations et aux soins courants 1. Transport il faut un certain temps aux animaux après leur arrivée à l'établissement pour retrouver un état physiologique un minimum d’une semaine est recommandé 2. Hébergement cages l’espace dont dispose chaque animal et le nombre d’animaux par cage doivent demeurer constants durant l’étude il existe des différences significatives au niveau de la température, de l’humidité, de la qualité de l’air, du bruit et des vibrations d’un type de cages à un autre 22

Facteurs liés à l'entretien, aux manipulations et aux soins courants 2. Hébergement (suite) enrichissement du milieu : peut améliorer le bien-être de l’animal doit être identique pour tous les animaux et constant tout au long de l’étude Des hamacs peuvent être placés dans les cages pour les rendre plus intéressantes et stimulantes pour les furets Des jouets et des objets à mâcher permettent aux animaux de prendre des postures typiques à leur espèce et leur fournissent une activité Pour obtenir de plus amples renseignements sur ce sujet, veuillez consulter le Module de formation du CCPA sur: l’enrichissement du milieu (2003) ainsi que le microsite du CCPA sur les Trois R au www.ccac.ca/fr/alternatives 23

Facteurs liés à l'entretien, aux manipulations et aux soins courants 3. Soins courants, hébergement et manipulations tous les animaux devraient être manipulés de façon uniforme et au même moment de la journée si cela est impossible, ils devraient être manipulés de façon aléatoire la manipulation devrait se faire en douceur et de la même façon pour limiter la variabilité le mode de manipulation d’un animal peut modifier son comportement ou sa physiologie, et ainsi influencer sa réaction dans une étude 24

Facteurs liés aux manipulations aux fins de la recherche 25

Facteurs liés aux manipulations aux fins de la recherche 1. Moment et durée de la manipulation les prélèvements de plusieurs échantillons devraient être effectués tous les jours au même moment la durée des manipulations devraient être uniformisée 2. Facteurs expérimentaux de stress un animal devrait être familiarisé aux manipulations avant le début du projet afin de réduire son stress La rédaction de procédures normalisées de fonctionnement (PNF) est recommandée afin d’uniformiser les manipulations de chaque animal 26

Facteurs liés aux manipulations aux fins de la recherche 3. Douleur la douleur non traitée affecte plusieurs aspects biologiques et physiologiques des animaux la douleur ressentie par un animal dépendra : de la dose et le moment d’administration des analgésiques utilisés de l’habileté de la personne qui manipule l’animal des expériences antécédentes de l’animal de la présence de peur et de stress chez l’animal Pour obtenir de plus amples renseignements sur ces sujets, veuillez consulter le Module de formation du CCPA sur : la douleur, la détresse et les points limites (2010) ainsi que le Module de formation du CCPA sur : l’analgésie (2003) 27

Responsabilités des membres de l’équipe de recherche Tous les membres de l’équipe jouent un rôle dans la maîtrise des variables expérimentales et non expérimentales 28

Chercheur principal Envisager toutes les variables pertinentes Consulter les PNF et s’y conformer pour : veiller à ce que toutes les variables expérimentales soient contrôlées assurer le suivi et l’enregistrement des mesures de contrôle pour les variables limiter l’introduction de maladies dans l’animalerie Veiller à ce que l’on vérifie l’état de santé des animaux avant de les acheter et à ce qu’un suivi régulier de l’état de santé soit effectué par la suite 29

Étudiants des cycles supérieurs, étudiants au postdoctorat et techniciens en recherche Effectuer le suivi et l’enregistrement des mesures de contrôle de toutes les variables Manipuler les animaux à l’aide des techniques appropriées Consulter et se conformer à toutes les PNF afin : de limiter l’introduction de maladies d’exécuter toutes les procédures expérimentales 30

Directeur de l’animalerie Veiller à ce que les paramètres environnementaux de l’animalerie soient maintenus à des niveaux uniformes Veiller à la qualité de la formation et l’expertise en matière de soins aux animaux Mettre en œuvre des PNF pour toutes les opérations touchant l’animalerie Veiller à ce que l’on vérifie l’état de santé des animaux avant de les acheter et à ce qu’un suivi de l’état de santé soit effectué par la suite 31

Personnel de soin aux animaux Effectuer les opérations quotidiennes de façon uniforme et conformément aux PNF Effectuer toutes les manipulations de soins aux animaux : de façon uniforme avec douceur sans cruauté 32

Personnel vétérinaire pour animaux d’expérimentation Surveiller l’état de santé des animaux Formuler des recommandations pertinentes en matière de santé animale Mettre en application les procédures visant à maintenir les animaux en bonne santé 33

En bref Les modèles animaux doivent être soigneusement sélectionnés selon les principes des Trois R De nombreux facteurs peuvent influencer la réponse du modèle animal : facteurs liés aux animaux facteurs physiques et environnementaux facteurs liés à l’entretien, aux manipulations et aux soins courants facteurs liés aux manipulations aux fins de la recherche Tous les membres de l’équipe de recherche et de soins aux animaux ont un rôle à jouer et doivent reconnaître et maîtriser ces variables Qualité des soins animaliers Qualité de la recherche scientifique 34

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